你知道色譜柱怎樣保養(yǎng)才是正確的嗎？每一根色譜柱都有一個大致的進樣針數(shù)壽命，理論上可以有一個規(guī)定，達到進樣多少針，就強制報廢。不過好像并沒有這樣的規(guī)定，那么也可以作為一個參考，當(dāng)色譜柱的柱性能參數(shù)（就是常說的理論塔板數(shù)、分離度、拖尾因子等等）不達標(biāo)時，參照進樣針數(shù)判斷是柱子壽命到了，屬于不可逆因素，只能換柱子。還是其它原因，如流動相配制錯誤，或者流動相變質(zhì)了，也可能稀釋液強度太大，也可能是方法就是錯的，也可能是樣品本身問題。

　　不過色譜柱的累積性損壞自然不是一朝一夕的事，柱性能是緩慢下降的，但是沒有一個特定的標(biāo)準(zhǔn)，要看具體的分析方法，而且跟柱型號也有關(guān)系。常規(guī)的分析方法下C18柱壽命是很長的，因為C18柱是目前技術(shù)最先進，質(zhì)量最可靠，使用最廣泛的色譜柱，在常規(guī)分析方法下，基本上不會損壞。但是如果流動相比較特殊，如高鹽、高pH>8、低pH<1、高柱溫、高比例水相、高比例有機相等等，色譜柱的損壞就會相應(yīng)地加劇。

　　這些可以算作是化學(xué)損傷，如果是操作不當(dāng)，例如，流動相和樣品溶液沒有過濾，或者撞擊色譜柱等，也會造成物理損傷，也會嚴(yán)重影響色譜柱壽命，甚至是“一招斃命”。

　　前面提到了柱型號，不同型號的色譜柱壽命當(dāng)然也不一樣，跟前面說到的C18類似的，CN柱、苯基柱等鍵合硅膠柱都具有較長的使用壽命。不過所有基于硅膠基質(zhì)的色譜柱都有一個天生的弱點，就是硅膠是能被水溶解的，雖然溶解度很小，但是長年累月使用，尤其在反相色譜系統(tǒng)中，累加了高鹽、高pH、高柱溫、高比例水相等方法參數(shù)后，硅膠的流失尤為明顯。我做過一個項目，流動相含鹽，柱溫高達50度，基本上一根色譜柱半年就報廢了。不過，是有一種方法可以解決這個問題的，就是在色譜柱前加一個柱芯與色譜柱類型相同的預(yù)柱，也叫保護柱，當(dāng)流動相里溶解預(yù)柱里的硅膠飽和以后，就不再侵蝕色譜柱的硅膠，從而大大延長色譜柱壽命。不過不到萬不得已還是不要使用特別苛刻的流動相，要知道預(yù)柱的柱芯也是很貴的，那就是一根較短的色譜柱啊，就算保住了色譜柱，經(jīng)常換柱芯也是吃不消的。

　　但是有一些類型的色譜柱，天生就是短命鬼，例如NH2柱，有時候好不容易平衡好系統(tǒng)，進個幾十針樣就OVER了，像是一次性的。就像焰火，它華麗的現(xiàn)身，轉(zhuǎn)瞬就湮滅了。這些就留待色譜柱專家們?nèi)ラ_發(fā)更加穩(wěn)定可靠的新填料了。

　　還有一類柱子，就是手性分離柱，這在醫(yī)藥行業(yè)是很大的一個應(yīng)用。通常手性色譜柱是正相柱，這就要求我們在使用手性柱之前要先把系統(tǒng)置換干凈，再接上柱子用流動相沖洗平衡進樣。通常是甲醇、異丙醇、正已烷+異丙醇、流動相這樣的順序，如果忘記這個過程，會造成很大的麻煩。而且有一些手性柱是涂敷柱，例如淀粉、纖維素等大分子涂敷柱非常怕水，如果系統(tǒng)中原來的反相流動相沒有置換干凈，就會對色譜柱造成不可逆損傷，甚至報廢。近年來，科學(xué)家也開發(fā)出了鍵合的手性柱，相比較要穩(wěn)定的多，甚至也可以應(yīng)用反相色譜系統(tǒng)。

　　使用后對色譜柱的沖洗保存也比較重要，使用了緩沖系統(tǒng)的尤其要注意。這里推薦一個反相色譜系統(tǒng)的通用沖洗流程：將所有通道置換成含有較低有機相比例的水相中，比如10-30%乙腈或甲醇，然后沖洗1個小時，然后再梯度增加有機相比例，各沖洗一定時間，最終保留在高有機相比例的沖洗液里。低有機相比例的沖洗液是為了盡可能地沖洗緩沖鹽。通常低壓梯度洗脫的液相色譜儀采用的是四元泵，就是單泵四通道，比例閥混合。這種混合方式有個弊端，就是混合效果差，因為各通道不同比例是通過開關(guān)各通道閥的時間來控制的。打比方乙腈：緩沖鹽=50：50，如果流速是1.0mL/min，并不是說乙腈和緩沖鹽以各0.5mL/min的流速來混合；而是流速一直是1.0mL/min，但是在往復(fù)泵一個來回的時間內(nèi)，兩個通道分別打開一半的時間，也就是說系統(tǒng)管道里是一段乙腈、一段緩沖鹽。這樣就會造成鹽的析出。所以，往往是兩通道混合，就算沒有用緩沖鹽，還是建議先按比例混合好了，然后走單通道，否則的話一樣會造成鹽析出，或者基線波動。